自身抗体之“你问我答”——抗RNP抗体和抗Sm抗体
转自:浩欧博
抗RNP抗体和抗Sm抗体分别针对的自身抗原是什么?
在回答抗RNP抗体和抗Sm抗体所针对的抗原之前,首先需要了解和认识真核细胞核内的UsnRNP颗粒。真核细胞的前体mRNA (pre-mRNA)转变为成熟mRNA的过程中,需要对编码序列中非编码内含子(non-coding introns)进行剪切,此过程被称为mRNA剪切(mRNA splicing)。在mRNA剪切的过程中,mRNA剪切子(the spliceosome)发挥重要的生物学功能。而mRNA剪切子主要由一组富含尿嘧啶的小核内核糖核蛋白(uridine-rich small nuclear ribonucleoproteins,UsnRNPs)以及多个非snRNP剪切因子组成。而每一个UsnRNP颗粒又分别由一个UsnRNA核酸分子、7个Sm或Sm样蛋白和数个颗粒特异性蛋白组成。其中,U1、U2、U4、U5和U6等snRNP组成的mRNA剪切子负责大部分前体mRNA的剪切过程,而U4atac、U5、U6atac、U11和U12等snRNP组成的mRNA剪切子则仅针对少数前体mRNA。
了解完UsnRNP颗粒的主要组成后,对于抗RNP抗体和抗Sm抗体所针对的具体抗原的理解就比较容易了。抗RNP抗体专门针对U1snRNP颗粒当中的三个颗粒特异性蛋白质,分别为蛋白70kDa、蛋白A和蛋白C。而抗Sm抗体则专门针对U1、U2、U4和U5等snRNP颗粒中的7个Sm蛋白(分别为B/B‘、D1、D2、D3、E、F、G),其中B/B‘、D1、和D3是抗Sm抗体最重要的靶抗原蛋白。真核细胞U1snRNP颗粒的结构如下图所示:
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snRNP、UsnRNP、U1snRNP和RNP/Sm(或nRNP/Sm)等抗原英文简称分别代表什么?
snRNP (small nuclear ribonucleoproteins,小核内核糖核蛋白)特指细胞核内一类由特定RNA核酸分子与部分蛋白质共同组成的核糖核蛋白颗粒结构,当与其它特定蛋白质结合在一起后可发挥针对前体mRNA的剪切功能,从而促进前体mRNA转化为成熟mRNA。
UsnRNP(uridine-rich small nuclear ribonucleoproteins,富含尿嘧啶的小核内核糖核蛋白)则特指细胞核内一组富含尿嘧啶的小核内核糖核蛋白。每一个UsnRNP颗粒又分别由一个UsnRNA核酸分子、7个Sm或Sm样蛋白和数个颗粒特异性蛋白组成。根据尿嘧啶含量的不同,又分为U1、U2、U4、U5、U6、U11和U12等不同类型的UsnRNP,UsnRNP是体内mRNA剪切子的重要结构组分。
U1snRNP则特指以U1-RNA为核酸分子的snRNP复合物颗粒。抗RNP抗体所针对的靶抗原为该复合物颗粒中的70kDa、蛋白A和蛋白C三个蛋白质。
RNP/Sm(或nRNP/Sm)则特指天然U1snRNP。在部分采用天然抗原检测抗RNP抗体的检测试剂盒中,往往使用RNP/Sm(或nRNP/Sm)等英文名称。从这个角度来看RNP/Sm(或nRNP/Sm)与天然U1snRNP实属于同一物质,仅仅是英文名称表达不同而已。
上述四个抗原英文名称的相关关系如图2所示:
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抗RNP抗体和抗Sm抗体检测试剂中使用天然抗原和重组抗原分别有哪些优劣势?
随着分子生物学技术的不断发展,针对RNP和Sm抗原的研究也越来越清晰和全面,因此在抗RNP抗体和抗Sm抗体检测过程中,既可以选择天然抗原也可以选择重组抗原。从目前的临床研究结果和数据来看,天然抗原和重组抗原应用于上述两种抗体检测时分别具有各自的不同优势和劣势。RNP和Sm天然抗原和重组抗原对比情况如表1所示:
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抗RNP抗体和抗Sm抗体的临床意义和价值是什么?
高滴度的抗RNP抗体对于混合结缔组织病(Mixed Connective Tissue Disorder, MCTD)的临床诊断发挥重要的作用。但并不意味着抗RNP抗体对MCTD具有高度的疾病特异性。抗RNP抗体在25-47%的系统性红斑狼疮(SystemicLupus Erythematosus,SLE)患者中也可检测到,尤其是具有雷诺氏现象的SLE患者中该抗体出现的几率更高。
尽管抗Sm抗体在SLE患者中的抗体发生率仅为10-30%,但该抗体对SLE具有高度的疾病特异性,因此被列入美国风湿病学会(American College of Rheumatology, ACR)SLE疾病分类标准中。该抗体与SLE患者肾脏受累具有相关性,尤其是抗双链DNA抗体和抗Sm抗体同时阳性时,患者肾脏受累的几率明显升高。已有研究表明,抗Sm抗体量值水平与SLE疾病活动度具有良好的相关性,因此临床实践中应重视该抗体量值水平在疗效监测中的作用和价值。
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抗RNP抗体和抗Sm抗体的检测方法包括哪些,各有什么优劣势?
目前,早期针对抗RNP抗体和抗Sm抗体的检测方法主要以对流免疫电泳(counterimmunoelectrophoresis,CIE)、免疫印迹法(LineImmunoassay,LIA)、酶联免疫吸附法(Enzyme linked Immunosorbent Assay, ELISA)等传统的免疫学检测技术为主。近年来更先进的化学发光法(Chemiluminencence Immunoassay, CLIA)已经逐步应用到上述两种抗体的临床检测中,并且由于该方法具有自动化、定量化、智能化和个性化等显著特点和优势,正在逐渐替代传统的检测技术。上述几种常见抗RNP抗体和抗Sm抗体的检测技术优劣势如表2所示:
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